2017

Titulo

Implementación de la determinación de los biomarcadores genéticos kras, braf y EGFR por PCR en tiempo real.

Autores

Alexander Ortega Carballosa , Nadezhda González García , Gissell García Menéndez , Jorge Luis Soriano García

Resumen


Introducción: El cáncer constituye la primera causa de muerte en Cuba. Alrededor de 40 mil nuevos casos se diagnostican cada año en el país. Los tratamientos de nueva generación, encaminados a inhibir el crecimiento, la progresión y diseminación del tumor, se basan en la modificación de proteínas blancos asociados a los mismos. En este sentido, se han identificado los marcadores kras, braf y EGFR entre más de 380 genes de pronóstico y predictores de respuesta al tratamiento.

Objetivos: Implementar el PCR en Tiempo Real (PCR-TR) para la determinación de los marcadores genéticos kras, braf y EGFR.

Métodos: Se emplearon muestras de biopsias de adenocarcinoma de colon, pulmón y páncreas embebidas en parafina a las cuales se les realizó la  extracción del ADN utilizando el estuche comercial Cobas DNA sample preparation kit (IVD). El PCR-TR se realizó en el sistema COBAS 4800 (Roche) empleando estuches comerciales IVD para detectar las mutaciones kras,  braf y EGFR (Roche).

Resultados: La concentración del ADN que se obtuvo a partir de las 12 muestras de biopsias embebidas en parafina osciló entre los 30 y 40 ng/ml, con una pureza superior a 1,7. Los controles negativos y positivos fueron válidos para todas las determinaciones. Dos casos fueron positivos para braf, seis para kras y una al EGFR.

Conclusiones: Quedó implementado un método novedoso en Cuba para la determinación de biomarcadores genéticos kras, braf y EGFR por PCR en tiempo real, que abre el camino a la medicina de precisión en el cáncer.