Introducción: La hiperglicinemia no cetósica es un error innato del metabolismo de la glicina, debido a un déficit en el sistema de clivaje de la glicina. Se caracteriza por niveles elevados de glicina en tejidos, sangre, orina y líquido cefalorraquídeo. Las convulsiones y daño en el sistema nervioso central son las principales manifestaciones clínicas. Están descritas tres variantes de la enfermedad: la clásica, las atípicas y la transitoria. El diagnóstico bioquímico se realiza mediante el análisis de ácidos orgánicos en orina y la cuantificación de glicina en plasma y líquido cefalorraquídeo. En Cuba no contamos con un programa de pesquisa neonatal para esta enfermedad, que permita realizar el diagnóstico precoz; por lo tanto el diagnóstico se realiza por los hallazgos clínicos. Objetivo: implementar un protocolo para el diagnóstico bioquímico de la Hiperglicinemia no cetósica. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio transversal en 507 pacientes con sospecha clínica de aminoaciduría ó aciduría orgánica en el período de Enero 2014-Abril 2017. La cuantificación de glicina en sangre y LCR (HPLC) sólo se realizó en los pacientes que presentaron un perfil normal de ácidos orgánicos en orina (GC-MS). Resultados: Cinco pacientes con convulsiones refractaria a tratamiento presentaron niveles elevados de glicina en orina, suero y perfil normal de ácidos orgánico. Además, presentaron coeficiente de glicina en LCR/plasma > 0,08. Teniendo en cuenta los síntomas clínicos, así como la edad de aparición de los mismos las variante más frecuentes fueron la neonatal clásica y la infantil. Conclusiones: Se implementó un protocolo para el diagnóstico bioquímico de la Hiperglicinemia no cetósica.